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細胞簡介：
生長特性： | 貼壁生長
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細胞來源： | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進 |
培養(yǎng)條件： | 培養(yǎng)基：DMEM-H培養(yǎng)基+10%FBS（推薦HAKATA特級胎牛血清 貨號：HS-FBS-50） 氣相：空氣95%，二氧化碳5% 溫度：37℃ |
培養(yǎng)： | 貼壁細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養(yǎng)液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代； 2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%，需要對其進行傳代，*傳代比例為1:2。 3傳代步驟：將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱，倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS，輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶，置于37°孵育消化（*消化需時常取出置于顯微鏡下觀察，以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為zui佳消化時間，記錄zui佳消化時間，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后收集細胞懸液，1200rpm離心3min，棄上清，加入*培養(yǎng)基重懸細胞，進行傳代。 懸浮細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒，然后置于無菌操作臺，打開瓶口，輕輕吹打后，將其中的細胞懸液轉移到離心管中，然后1200rpm離心3min，去上清； 2.將離心好的細胞轉移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基，然后將其置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液（離心后去舊液，加入新鮮培養(yǎng)基）； 3.顯微鏡觀察細胞數(shù)目比較多時，對其進行傳代，*傳代比例為1:2（離心后平均分成兩瓶培養(yǎng)）。
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細胞總數(shù)： | 1~3*106 |
傳代周期： | 2-3天 |
傳代比例： | 1:2~1:4 |
換液頻率： | 2-3天 |
凍存液： | 90%FBS+10%DMSO |
注意事項：
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復使用，請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細胞，若大部分細胞漂浮，置于培養(yǎng)箱隔夜觀察，大部分漂浮細胞重新貼壁，表明細胞活力正常，繼續(xù)培養(yǎng)，剩余漂浮的細胞可以去掉；若大部分細胞仍然不貼壁，將漂浮的細胞離心收集，用臺盼藍染色鑒定細胞活力，并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。
4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片，記錄細胞狀態(tài)，如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內與本公司銷售聯(lián)系，以便于更好的幫您解決問題，超過時間我段，本公司則默認細胞狀態(tài)良好，不免費對后續(xù)細胞狀態(tài)問題進行售后。
5 因細胞產(chǎn)品的特殊性，如客戶對本公司細胞質量存有疑問，請于收到細胞后一個月內與本公司銷售聯(lián)系，超過時間段，本公司則默認細胞質量優(yōu)良，不承擔因細胞產(chǎn)生的任何責任。
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品牌 貨號 名稱 規(guī)格
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Gibco 11811031 geneticin 5g G418 5g
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Gibco 12200036 IMCM培養(yǎng)基 10*1L
BIOWEST G-10 西班牙瓊脂糖 100g
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相關主要細胞為：C666-1細胞，MREpic細胞株，HBMEC細胞 ，KGN細胞，IOSE80細胞，HUVEC細胞，HAEC細胞等，細胞活力好，狀態(tài)*，密度適宜，售后齊全，跟蹤及時到位！
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