HEC-59細胞，HEC-59細胞株

細胞名稱：HEC-59細胞，HEC-59細胞株

傳代方法：消化3-5分鐘。1:2.3天長滿

傳代情況：不詳

支原體檢測：陰性

使用權(quán)限：A類

備注：　

培養(yǎng)用小牛血清的處理：市場上出售的小牛血清一般做了滅菌處理，但在使用前還應(yīng)做熱滅活處理，即通過加熱的方法破壞補體(近來也有觀點認為熱滅活處理是不必要的)。胎牛血清不必滅活。1、 將血清加熱至56℃并保持30 min，其間要不時輕輕晃動，使受熱均勻，防止沉淀析出。2、 處理后的血清貯存于4℃。3、 小牛血清在使用前進行篩選以掌握血清的質(zhì)量。

上?；鄯f生物科技細胞培養(yǎng)的注意事項：

1.玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時以上;

2.無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈，紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時以上;

3.培養(yǎng)基(pH7.2)和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養(yǎng)基內(nèi)，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養(yǎng)基5-10ml置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2-3天，肉眼見無渾濁或沉淀等異物。分裝后置4度保存;

4.消化液(pH7.8)或其它加入液，應(yīng)用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌，分裝成支置-20度保存;

5.培養(yǎng)箱應(yīng)先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍(如有紫外線的應(yīng)照射1小時以上，如有高溫滅菌的應(yīng)按程序來菌)。至少每月一次。

6.進入操作時應(yīng)注意先清洗雙手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作時注意無菌臺內(nèi)空間層次。手及物品不要在暴露的瓶口上方來往，如果數(shù)量較多，培養(yǎng)瓶應(yīng)放在與酒精燈平行地方便于操作，瓶與瓶之間應(yīng)相隔一定的距離，開瓶(蓋)時應(yīng)先用75%酒精反復(fù)擦拭或用燈燒，打開后應(yīng)用燈先燒口，然后燒蓋。用完后同樣操作。整個操作過程盡量在無菌臺靠里面一點。

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