RWPE-1細(xì)胞株RWPE-1細(xì)胞價(jià)格 慧穎細(xì)胞庫(kù)提供傳代 凍存細(xì)胞，存活率高，*，復(fù)蘇周期短！慧穎提供400多種類(lèi)細(xì)胞株細(xì)胞系、耐藥株、原代細(xì)胞、熱賣(mài)種類(lèi)有：卵巢癌細(xì)胞、乳腺癌細(xì)胞、胃癌細(xì)胞、肺癌細(xì)胞、前列腺、舌鱗癌細(xì)胞、結(jié)腸癌細(xì)胞等，： ！

細(xì)胞介紹：RWPE-1細(xì)胞為人正常前列腺上皮細(xì)胞，來(lái)源于人正常前列腺，中文名為人正常前列腺上皮細(xì)胞，正常的細(xì)胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長(zhǎng)。腫瘤抑制基因： p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺組織切片的周?chē)鷧^(qū)域的上皮細(xì)胞用單拷貝的人乳頭瘤病毒的18(HPV-18)進(jìn)行轉(zhuǎn)化，建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 細(xì)胞株 [PubMed: 9214605]. 在三維Matrigel培養(yǎng)時(shí)，在雄激素作用下，RWPE-1細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基中分泌PSA。[PubMed: 11170142]. 當(dāng)與Matrigel或基質(zhì)細(xì)胞混合注射雄性裸鼠時(shí)，RWPE。

培養(yǎng)基：這株細(xì)胞的基本培養(yǎng)基作為Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分： 角化細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基K-SFM，kit目錄號(hào)17005-042。隨kit提供這株細(xì)胞生長(zhǎng)所需的兩種添加劑（牛垂體提取物BPE及人重組表皮生長(zhǎng)因子EGF）。 配制*生長(zhǎng)培養(yǎng)基，需添加以下成分： 0.05 mg/ml BPE – 隨K-SFM提供 5 ng/ml EGF -隨K-SFM提供。K-SFM，BPE 0.05mg/ml，EGF 5ng/ml（Gibco試劑盒17005-042）。

培養(yǎng)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：洗滌：不含Ca++/Mg++離子的D-PBS；消化：溶于D-PBS的0.05% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液，消化5-10min，不能拍打培養(yǎng)皿, 需要靜止自然消化；中和：0.1% 大豆胰蛋白酶抑制子或含2%FBS的D-PBS；離心125×g, 5~7min

傳化比例：1：3-1：5

換液時(shí)間：2天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS, 10% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

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SW 1990 SW 1990

慧穎運(yùn)輸：短途運(yùn)輸問(wèn)題不大?？墒情L(zhǎng)途天熱時(shí)，我們要做好相應(yīng)的運(yùn)輸安全措施?；罴?xì)胞的運(yùn)輸方法相對(duì)比較簡(jiǎn)單，a)將該瓶細(xì)胞裝滿培養(yǎng)基，這樣做的目的是讓所有細(xì)胞都始終有營(yíng)養(yǎng)供給。b)用酒精擦拭培養(yǎng)瓶，瓶口用封口膜包好。c)細(xì)胞取回后，半量換液。冬天則是采用全血清包被細(xì)胞運(yùn)輸，細(xì)胞運(yùn)輸中處于休眠狀態(tài)，收到細(xì)胞以后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶，加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度：若未超過(guò)80%匯合度，換液繼續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過(guò)80%匯合度，可直接進(jìn)行傳代。

對(duì)于RWPE-1細(xì)胞株RWPE-1細(xì)胞價(jià)格貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。