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              CaOV3細(xì)胞培養(yǎng)

              發(fā)布時(shí)間:2016-05-19瀏覽:1668次

              CaOV3細(xì)胞培養(yǎng)

              慧穎生物作為國(guó)內(nèi)幾大生物試劑供應(yīng)商,提供產(chǎn)品種類(lèi)多,囊括:檢測(cè)試劑 、圖像光學(xué) 、免疫檢測(cè) 、生物器材 、原料試劑、檢驗(yàn)醫(yī)技、抗原抗體、家用醫(yī)療、消耗材料、檢測(cè)治療、生物耗材等,公司坐落于上海眾仁路399號(hào)運(yùn)通星財(cái)富廣場(chǎng),公司交通便利,環(huán)境優(yōu)雅,慧穎生物幾十名員工,熱烈歡迎您的參觀指導(dǎo)。

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              抗原抗體|動(dòng)物疫病診斷試劑盒|酶免Elisa試劑盒

              進(jìn)口胎牛血清|Gibco血清|BOVOGEN血清|SERANA血清

              常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)方法

              初代培養(yǎng)

              原理

              將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖,這一過(guò)程稱(chēng)原代培養(yǎng)。    

              儀器、材料及試劑

              儀器:培養(yǎng)箱(調(diào)整至37),培養(yǎng)瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術(shù)器械、血球計(jì)數(shù)板、離心機(jī)、水浴箱(37

              材料:動(dòng)物組織塊

              試劑:1640培養(yǎng)基(含20%小牛血清),0.25%胰酶,Hank′s液,碘酒

              初代消化培養(yǎng)法

              1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

              2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。

              3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。

              4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。

              5.消化:或用恒溫水浴,或置于37溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

              6.分離:在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

              7.計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說(shuō)明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。

              8.培養(yǎng):置于36.5溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時(shí)需要換新塞。

              我們實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞傳代的一般方法

              這一方法較簡(jiǎn)單,不需要離心,而且消化后細(xì)胞很少聚集成團(tuán),具體步驟如下:

              1、吸盡待傳代細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,按11 的比例加入適量0.25%胰酶和0.0 2EDTA(一般100ml培養(yǎng)瓶各加2滴管消化(消化時(shí)不要晃動(dòng)培養(yǎng)瓶,以免消化不*而導(dǎo)致細(xì)胞成片脫落,從而導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán),無(wú)法吹散)。

              2、消化致細(xì)胞變圓,細(xì)胞相互脫離接觸但還未從瓶壁脫落時(shí),吸盡胰酶和EDTA。

              3、利用殘留的胰酶和EDTA繼續(xù)消化數(shù)分鐘。

              4、加入適量培養(yǎng)液,反復(fù)吹打,然后分別接種致新的培養(yǎng)瓶。

              注:消化的時(shí)間需根據(jù)不同細(xì)胞摸索確定。

              ACC-2人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞

              ACC-3人腺樣囊性癌

              ACHN人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞

              AE-1雜交瘤細(xì)胞抗AChE

              AE-2雜交瘤細(xì)胞抗AChE

              AGS人胃腺癌細(xì)胞

              AN3CA人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞

              ANA-1小鼠巨噬細(xì)胞

              ARO甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)

              AsPC-1人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞

              ATT-20小鼠垂體瘤

              B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞

              B16-F10小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞

              B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞

              BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

              Bcap-37人乳腺癌

              BEL-7402人肝癌

              BEL-7404人肝癌

              BEL-7405人肝癌

              Beta-TC-6小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞

              BGC-823低分化胃腺癌

              BHK-21 [C-13]倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞

              BIU-87人膀胱癌細(xì)胞

              BMSC人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

              BNL CL.2小鼠胚胎肝細(xì)胞

              BRL大鼠肝細(xì)胞

              BRL 3A大鼠肝細(xì)胞

              BT-20人乳癌

              BT-325人腦多形性膠質(zhì)瘤細(xì)胞

              BT474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

              BT-549人乳腺管癌細(xì)胞

              BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞

              C127小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞

              C200人卵巢癌

              C26小鼠結(jié)腸癌

              C2C12小鼠成肌細(xì)胞

              C-33 A人子宮頸癌

              C3H小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

              C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

              Ca Ski人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞

              Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

              CaKi-1人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞

              CaKi-2人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞

              CAL-27人舌鱗癌細(xì)胞

              Calu-1人肺癌細(xì)胞

              Calu-3人肺腺癌 (胸水)

              Calu-6人退行性癌細(xì)胞

              CaOV3人卵巢癌細(xì)胞

              Capan1人胰腺癌細(xì)胞

              Capan2人胰腺癌細(xì)胞

              CaSki人宮頸腸轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞

              CBRH-7919大鼠肝癌細(xì)胞

              CCD-1095Sk人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞

              CCRF-CEM人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞

              CEM/C1人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

              CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞

              Chang liver人張氏肝細(xì)胞

              CHL倉(cāng)鼠肺細(xì)胞

              CHO中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞

              CHO/dhFr倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷

              CHO-K1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株

              CL1人前列腺癌

              CCRF-CEM人鼻咽癌細(xì)胞

              CNE-2人鼻咽癌細(xì)胞

              COLO 205人結(jié)腸癌細(xì)胞

              COLO 320DM人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

              COLO-704人卵巢癌細(xì)胞

              COLO720E人卵巢癌細(xì)胞

              COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞

              COS-7非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞

              COV362人卵巢癌細(xì)胞

              COV434人卵巢癌細(xì)胞

              COV504人卵巢癌細(xì)胞

              COV644人卵巢癌細(xì)胞

              CRFK貓腎細(xì)胞

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