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              HFTF-HFTF細(xì)胞 細(xì)胞株培養(yǎng)

              發(fā)布時間:2016-08-04瀏覽:1576次

              標(biāo)題名稱:HFTF-HFTF細(xì)胞 細(xì)胞株培養(yǎng)

              產(chǎn)品名稱:HFTF細(xì)胞

              中文名稱:人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞

              規(guī)格:1~3*106細(xì)胞/25cm2培養(yǎng)瓶

              代數(shù):P3-P5

              培養(yǎng)條件:DMEM-H+10%FBS(SERANA或GIBCO)

              傳代方法:1:2~1:4傳,2-3天1次

              生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

              生長狀態(tài):貼壁生長

              存儲條件:90%FBS+10%DMSO

              庫存狀態(tài):現(xiàn)貨

              HFTF-HFTF細(xì)胞 細(xì)胞株培養(yǎng) 對于貼壁細(xì)胞,若細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,換成新鮮的培養(yǎng)基;如細(xì)胞還不貼壁,將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,原培養(yǎng)瓶加部分新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。對于懸浮細(xì)胞:收到細(xì)胞后,將細(xì)胞全部離心,去掉舊的培養(yǎng)基,換成新鮮的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

              特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸,建議添加雙抗培養(yǎng))

              (1)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天有少量或沒有飄忽的細(xì)胞可以當(dāng)天換液,因?yàn)槁吠绢嶔ぴ斐纱罅匡h忽的情況時,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)

              (2)收到細(xì)胞后請盡快更換為含10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時)

              (3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并SUER技術(shù)人員

              細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):

              1)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長特性生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)

              2)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決

              3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

              細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)

              (1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間,通??刂圃?-2min)

              (2)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存

              (3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

              (4)鏡下觀察消化情況,在HS505.T人淋巴結(jié)成纖維樣細(xì)胞生長特性邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让?,加6-8ml*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。

              請各位老師以隨貨HFTF-HFTF細(xì)胞 細(xì)胞株培養(yǎng)說明為主

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