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              大腸桿菌宿主殘留蛋白elisa試劑盒

              發(fā)布時(shí)間:2012-09-03瀏覽:1625次

              標(biāo)本要求    
              1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),ELISA試劑盒價(jià)格可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
              2.不能檢測含NaN3的樣品,ELISA試劑盒因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

              操作步驟
              1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:豬ELISA試劑盒本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,禽ELISA試劑盒用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

              16ng/L
              5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品白介素ELISA試劑盒
              150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
              上海ELISA試劑盒 
              8ng/L
              4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
              150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
               
              4ng/L
              3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
              150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
               
              2ng/L
              2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
              150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
               
              1ng/L
              1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
              150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
               
              2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
              3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
              4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
              5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
              6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
              7. 溫育:操作同3。
              8. 洗滌:操作同5。
              9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
              10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
              11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

               使用目的:

               本試劑盒用于測定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)含量。

               實(shí)驗(yàn)原理

               本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法ELISA試劑盒測定標(biāo)本中大腸桿菌豬ELISA試劑盒宿主殘留蛋白(E.coli P)水平。用純化的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的禽ELISA試劑盒微孔中依次加入大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P),再與HRP標(biāo)記的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)抗體結(jié)合,     上海ELISA試劑盒形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,ELISA試劑盒價(jià)格并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)呈正相關(guān)。白介素ELISA試劑盒用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)濃度。
               

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